在常见的试剂实验中,我们经常会用到血清作为实验样本,那么血清的血涂片的质量控制是zui紧要的一步,以下要求少一步都不行。跟随上海劲马来看看血涂片的质量控制有哪些要求。
1.血膜片的质量要求是厚薄均匀适度,低倍镜下观察全片,细胞不重叠,头尾及 两侧有一定的空隙,血膜头部有明确的病人标志。
2.些体积较大的特殊细胞常在血膜的尾部出现,因此蜡笔划线时应注意保存血膜 尾部细胞,血膜必须充分干燥,否则在染色过程中容易脱落。
3.配制染料须用甲醇,稀释染液用缓冲液,因为缓冲液的pH 对细胞染色的影响很重要。在偏酸性环境中正电荷增多,在偏碱性环境中负电荷增多,又因为细胞着色 对氢离子浓度十分敏感。如果染色偏碱,原是紫红色的中性颗粒则染成深蓝色,造成识 别困难。冲洗须用中性水,虽亦可用自来水 (但不能保持稳定)。
4.对所用染液应进行预染试验,新配制的染液放置一段时间后其中的美蓝逐渐氧 化成天青B ,天青B 对细胞核的着色效果比美蓝好,因此,瑞氏染液放置时间越长染色 效果越好,临床上称之为成熟。判断染液成熟程度的简易方法是用正常血片做预染 试验,先用低倍镜观察载有染液的血片,认为着色满意后,再按照染色后冲洗顺序zui后 用油镜镜检,这样不仅可了解染液的成熟程度,而且还可以选择合适的染色时间,供临 床标本染色时参考。
5.染液与缓冲液的比例要适当,以1∶27 为宜。一般说来缓冲液稀释度愈大,染色 时间愈长,细胞着色愈匀称、鲜艳。缓冲液和染液量要充足,否则染液很快蒸发,染料 沉淀于细胞上,使细胞深染而无法检查。细胞较多较厚的涂片 (如红细胞增多症) 染液 应多些。细胞较少的涂片染液应少些。
6.染色时间与染液浓度、室温高低、细胞多少有关,染液愈淡,室温越低,细胞 愈多,所需时间越长,应适当增加染液浓度,因此必须根据情况灵活掌握。
7.染色良好的血膜片,外观呈浅红色,红细胞呈粉红色,白细胞核呈暗紫红色, 染色质结构能辨,粒细胞的颗粒呈固有种异颜色。
上海劲马生物提示:做好血液涂片和正确染色是血液细胞检验的重要步骤,涂片和染色效果的好坏直接关系着检验的结果,必须以认真负责的态度注意操作过程的每一个环节。