麦红吸浆虫 S ito d i p losi s mosell ana (G eh in)是小麦生产中间歇性 、团块不均匀性猖獗成灾的
害虫 , 广泛分布于欧洲 、亚洲与北美洲 ;美国 、加拿 大 、英国 、德国 、芬兰 等国 家均 有严 重 成灾 的记 录[ 1] 。 我国曾在 2 0 世纪 5 0 年代和 80 年代两次大面积暴发成灾 , 对小麦生产造成了严重影响[ 2] 。
研究表明 , 麦红吸浆虫越冬幼虫所具有的滞育率 高 、滞育能力强 、高度延长滞育和 2 次滞育特点与 小麦吸浆虫的间歇性 、团块不均匀性猖獗成灾有密切的关系[ 3] 。 多年来 , 人们对麦红吸浆虫的滞 育习性及其调控机理进行了不懈的研究[ 3] 。 由于 该虫一年仅发生一代 , 个体小 , 一年中的绝大部分时间隐蔽在土壤中 , 人工大量饲养繁殖技术尚未解决 , 所以 , 在滞育机理研究方面虽然做了大量的 工作 , 但至今未能得出一个科学的答案 。幼激素是由昆虫咽侧体分泌的一类高萜类 化合物 , 在昆虫的变态发育过程中起着重要的作 用[ 4] 。 大量研究表明 , 保幼激素含量的变化是调 节昆虫滞育维持和终止的重要因子之一[ 5 ~ 7] 。
国内外尚未见有关小麦吸浆虫滞育与保幼激素滴度 变化之间关系的研究报道 。 鉴于此 , 本研究采用 气相色谱分析测定了麦红吸浆虫成虫和不同滞育 阶段幼虫的保幼激素滴度 。
1 材料与方法
1. 1 实验材料
2004 年 6 月初 , 在河北保定选择麦红吸浆虫
大发生田块 , 采集幼虫尚未脱穗的麦穗运回西北 农林科技大学 , 撒于地面并喷水保湿 , 使幼虫落地 入土 。 在不同时间采用淘土法[ 8] 获得不同滞育和
发育阶段的麦红吸浆虫幼虫 , 保存在低温冰箱(-70 ℃)中备用 。 供试成虫系于 2005 年 5 月初从 河北保定麦田网捕获得 。
1. 2 实验试剂
JH Ⅲ标准品为美国 S igma 公司产品 , 浓度为75 %, 正己烷为国产分析纯 。
1. 3 实验仪器
日本岛津公司 G C-16A 气相色谱仪 , 氢火焰 离子化检测器 , T L 9000 (金羊)色谱工作站 , 小型
玻璃匀浆器(0. 5 m L), B230 型超声波破碎仪 , 美 国 Beck man J22 21 型高速冷冻离心机 , 离心浓缩 系统 , 电子天平及其他实验室常用仪器
1. 4 样品预处理
取供试成虫或幼虫 , 用超纯水洗掉虫体表面 杂质 , 滤纸吸干水分 , 电子天平称重后移入玻璃匀 浆器中 , 加 1 0. 5 m L 正己烷冰浴匀浆 5 mi n , 超声 波细胞破碎仪破碎 5 mi n(超声设置 :40 次 , 每次
5 s , 间隔 5 s), 在 9 00 0 rp m , 4 ℃条件下离心 10 min 取上清液 。 正己烷重复提取 5 次 , 合并上清
液 。 上机前用离心浓缩系统进行浓缩近干 , 正己 烷定容至 25 μL , 以峰面积定量 。
1. 5 色谱条件
DBS-M S 毛细管柱 ;150 ℃开始升温 , 每分钟 升温 20 ℃, 到 2 80 ℃止 , 进样口温度 280 ℃, 检测 器温度 280 ℃, 分流比 20 ∶1 ;进样量 1 μL 。
2 结果与分析
2. 1 不同虫态保幼激素 Ⅲ滴度测定
测定结果表明 , 小麦吸浆虫像大多数昆虫一 样 , 体内含有保幼激素 Ⅲ 。 成虫和幼虫均含有一
定量的保幼激素 Ⅲ , 其中成虫的保幼激素 Ⅲ的含量为 0. 0 2 01 675 n g / mg , 幼虫保幼激素 Ⅲ的含 量则随滞育阶段而变化 。
2. 2 不同滞育阶段幼虫保幼激素 III 含量比较
从表 1 和图 1 可以看出 , 不同滞育阶段幼虫 保幼激素 III 的含量明显不同 。 麦穗幼虫和秋季 滞育幼虫保幼激素 III 的 含量比较接近 , 两者的 含量仅分别为 0. 0 148 8 30 n g / mg 和 0 . 0 13 9 798 ng / mg ;冬季滞育幼虫与翌年春季出土幼虫保幼 激素 III 的 含 量比 较接 近 , 两 者 的含 量 分别 为
0. 0 430 923 n g / mg和 0 . 0 434 508 n g /m g 。