大鼠（Rat）雌二醇（E2）ELISA检测试剂盒

本试剂仅供研究使用  标本：血清或血浆

大鼠雌二醇ELISA检测试剂盒试验原理：

        E2试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知E2浓度的标准品、未知浓度的样品 加入微孔酶标板内进行检测。先将E2和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中E2的浓度呈比例关系。

大鼠雌二醇ELISA检测试剂盒内容及其配制：

自备材料：

1.  蒸馏水。

2.  加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3.  振荡器及磁力搅拌器等。

样品收集、处理及保存方法：

1.  血清……操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。

2、  血浆……EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、  细胞上清液……1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、  组织匀浆……将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液。

 5、  保存……如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

大鼠雌二醇ELISA检测试剂盒操作注意事项：

●   试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

●   实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

●   不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

●   使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

●   使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

●   底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

●   加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

●   按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

安全性：

•   避免直接接触终止液和底物A、B，一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
•   实难中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
•   不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

大鼠雌二醇ELISA检测试剂盒的准备：

•   标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：

  洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。

试剂盒性能：

•   灵敏度：zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
•   特异性：不与其它细胞因子反应。
•   重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

大鼠雌二醇ELISA检测试剂盒操作步骤：

1.    使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2.    根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
3.    加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育45分钟。
4.    甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5.    每孔加入100ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6.    甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7.    每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育5分钟。避免光照。
8.    取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9.    在450nm波长处测定各孔的OD值。

【检测方法】：酶联免疫法/酶免法(ELISA)
【产品性状】：96T/48T，盒装液体
【贮藏】：2-8°C
【产品有效期】：二年，我公司Elisa试剂盒均为批次，可放心购买。
【产品主要成分】：酶标板,试剂,标准品等。
【标本】：血清/血浆/细胞培养上清液/组织匀浆/组织液/尿液/分泌物
【质量承诺】：我们坚持对产品质量作不断的评估、创新和改善以确保您对我们产品的高度信任。