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详情介绍
Elisa试剂盒产品参数
一、产品参数
通用名:小鼠甲状腺素抗体(TAb)ELISA试剂盒
二、包装规格 96T×1/盒、96T×2/盒
三、预期用途 本试剂盒用于检测猪血清中猪口蹄疫病毒3ABC抗体,用于区别口蹄疫野毒感染猪和用灭活疫苗免疫猪。
四、试剂盒原理
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗C3抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗C3抗体、HRP标记的亲和素,经过*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的C3呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
五、小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒组成
酶标板、酶标记物、样品稀释液、浓缩洗涤液、底物液A、底物液B、阳性对照、阴性对照
六、储存及有效期
于2~8℃避光保存,有效期为12个月。
包被板开封后请于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限为2个月。
七、适用仪器 含450nm、630nm波长的酶标仪,37℃恒温设备,可调微量移液器。
Elisa试剂盒操作步骤
小鼠甲状腺素抗体(TAb)ELISA试剂盒操作步骤
一、样品准备
1.取动物全血按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品1周内可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。
2.用样品稀释液将待检血清按100倍稀释(如2μl血清加入198μl样品稀释液中,混匀)。阴、阳性对照不用稀释。
3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。
二、检验方法
1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
2.取所需用量酶标板条,设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
3.空白对照孔加样品稀释液100μl;阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl;样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
4.混匀,置37℃反应30分钟。
5.扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。
6.每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。
7.洗涤,同步骤5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。
9.每孔加终止液50μl,混匀,用空白孔调零,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。
小鼠甲状腺素抗体(TAb)ELISA试剂盒原理实验条件和技术要点:
在应用ELISA时,首先要清楚下面内容:
1,是检测抗体还是抗原?
2,检测的结果是定性还是定量?
3,是否需要检测特异抗体的类型?
4,所用抗体/单克隆抗体的亲和力怎样?
(1)检测抗原 zui常用于检测抗原的方法是非竞争性的双抗体夹心法,其次是竞争法。但竞争法在具体实验中有些困难,特别是检测微生物的抗原,因为需要标记抗原,这对于某些抗原是很难做到的,甚至是不可能的。另外在竞争法中,酶标记的抗原与标本直接混合在一起,许多标本中含有酶抑制剂或蛋白A样物质,可影响ELISA的结果。
(2)检测抗体 检测抗体种类常用的方法是检测抗体种类的捕获法,这个方法常用于检测特异性IgG、IgA和IgM.。这个方法的*步是捕获所需要检测的一个种类的抗体,接下来是检测捕获的抗体是否是特异性抗原的抗体。间接ELISA在检测IgG时比较简单,但不适用于检测其他种类的抗体,因为血清中如果有特异IgG存在将与IgM或IgA等竞争结合抗原。
Elisa试剂盒结果分析
小鼠甲状腺素抗体(TAb)ELISA试剂盒结果分析
一、 参考值
实验正常的情况下,阴性对照≤0.15,阳性对照≥0.5。
二、检验结果的解释
样品A值≥0.38为阳性;样品A值在0.2到0.38之间为可疑;样品A值<0.2为阴性。