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GIBCO血清,胎牛血清透析
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更新时间:2019-03-19  |  阅读:1641

详情介绍

产品名称:GIBCO血清,胎牛血清透析
试剂级别:细胞培养级
产品产地:GIBCO原装
产品商标:GIBCO
产品规格:500ml/200ml/100ml
产品资料:实验方法技术资料
保存/运输:-5°C~-20°C
有效期限:请参阅产品标签

GIBCO血清,胎牛血清透析常见问题:

Q:如何正确解冻血清?

A:方法一:将冷冻血清从-20℃取出后,放置于4℃冰箱中过夜。次日,将血清转移到37℃的水浴中,摇动瓶身以加速血清的溶解。方法二:直接将血清从-20℃取出后,放置于37℃水浴中,不断摇晃瓶身使其加快解冻和混匀。

【注】解冻过程中,如果不晃动瓶身,当温度超过40℃的时候,血清可能会导致蛋白变性,析出沉淀。解冻后不宜在37℃水浴长时间放置。

Q:血清是否需要灭活?

A:对于大多数细胞的培养而言,是不需要的加热灭活的。但在免疫学研究、ES细胞培养、昆虫细胞和平滑肌细胞培养时推荐使用灭活血清。加热血清可以灭活血清中被激活的补体,但同时也会破坏热不稳定的蛋白。热灭活血清对细胞的生长只有微小的促进作用,甚至会因为灭活不当,破坏血清的品质,而抑制细胞的生长。

Q:血清灭活的方式?

A:按照正确的解冻方式*解冻血清,使其恢复到室温。将血清分装成50mL进行灭活。对于一次需要灭活500mL的操作,可以将一个相同体积的容器放置在水浴锅中,中间插入温度计,作为参考。当温度达到56℃时,加热30min进行灭活。

【注】在血清的加热和灭活过程中需要不断地进行摇晃混匀。

Q:血清中含有的絮状沉淀是什么?

A:正常血清有时候中会出现一些絮状的沉淀,这些絮状物一般是纤维蛋白和脂蛋白的沉淀,不会影响血清的品质,可以通过在4℃混匀后静置1h,400g离心5min去除。

操作步骤:
 血清通常在细胞培养中作为基础生长培养基的添加剂。常用血清是胎牛血清(FBS),也称FCS。胎牛血清是从适合人类卫生习惯的农场收集的。有时,也可能用其他的牛血清,如新生牛血清或者供体牛血清。在细胞培养中,血清供应了丰富的高分子蛋白,低分子量营养物,疏水载体蛋白和其他体外细胞生长必要的成分如激素和粘附因子。同时,血清可以增加培养基的缓冲能力或中和有毒成分,起到保护细胞的作用。在细胞培养过程中是否选择添加血清,主要根据基础培养基化学成分,培养细胞的类型和培养体系而定。
1、采集
在胎牛血清生产过程中,全血使用无菌一次性塑料袋收集,待凝结后分离,收集和冷冻储存血清。控制胎牛血清的初始收集是控制zui终血清产品质量的关键因素。只有初始原料符合我们的规范时才能允许生产。
2、血清原料
在市场存在两个胎牛血清标准:美国农业部标准(USDA)和欧洲标准。美国农业部标准,原始血清必须采自未发生疯牛病(BSE)和口蹄疫(FMD)疫情的国家,才可自由进口到任何国家,用于安全生产。而且研究者只有使用符合这种标准的血清,才被允许将其细胞和细胞产品送至其他同样有严格进口条款的国家,进行合作交流。
3、处理过程
优选数个批次冻存血清进行解冻,检验其内毒素和血红素的含量,满足标准的才能在冷藏条件下充分混合继续加工,进一步进行过滤除菌。NQBB依次通过预过滤和膜过滤来处理胎牛血清。zui后的过滤步骤为连续三次用100nm的滤膜过滤。过滤结束,血清采用无菌工艺进行分装,整个过程有效确保zui终产品无菌。血清生产的空气洁净度为100级。所有分装工作台都通过高效微粒空气过滤器过滤,并保持正压分装环境,对总微粒、悬浮微粒数和压力进行监控。分装后,终产品迅速-20度冻存,并隔离,直到所有的质量控制检测完成。
4、FBS质量控制
每批胎牛血清检测确认符合各项标准,并以书面的方式记录在质检报告中。
5、质量保证
胎牛血清生产过程在一个严格控制的条件下进行。紫外线灭菌,过滤除菌和分装是关键生产环节,可以确保血清的品质。与血清生产相关的数据作为专门的档案记录,从初步采集的原料到成品储存的整个生产过程,以及质量控制检测和结果都有备案,并可以在监控条件下追溯源文件。 胎牛血清生产过程遵循欧洲议会关于体外诊断的标准。

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