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兔子视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA试剂盒样品采集:
收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存1个月。-70度可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
本公司对所有售出产品保证质量,并提供良好的售后服务。
一、操作因素对ELISA结果的影响
ELISA操作步骤复杂,操作不当将引起较大的误差。以下叙述各个步骤中的影响因素。
1.加样
2.温育
3.洗涤
4.显色
5.比色
二、灰区的设置
通常情况下,ELISA定性实验以“阳性"和“阴性"来报告结果,两者间有一条分界线被称为“阳性判断值"(cut-off value,CO值),这是定性免疫测定结果报告的依据。
三、标本复查
ELISA手工检测过程复杂,影响因素较多,即使室内质控在控,也可能因孔间差异而造成结果的差异,因此加大复查力度是保证结果准确性的可靠方法,比如对HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等项目的可疑、弱阳性标本及少见模式的检测结果进行复查。
四、结果判断
常用下列几种方法表示结果:
1.定性测定
2.半定量测定 结果一般以滴度表示。
3.定量测定 即用已知量的标准品作一系列稀释后进行ELISA测定,绘制标准曲线,结果以量或单位表示。在ELISA定量检测中每一块反应板都必须绘制相应的标准曲线。
本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断!
兔子视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA试剂盒操作步骤:
用于检测未知抗体的间接法:
用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。
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加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)
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于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml, 37℃孵育30-60分钟,洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。
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加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
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终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
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结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+"、“-"号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
本公司提供各种种属各种系列ELISA检测试剂盒,主要用于科研方面,不用于临床诊断。可以用于检测各种指标。
样品要求
·客户需提供待检测抗体和包被用抗原。
·检测的样本为细胞培养上清、人和动物的血清、血浆。
·样本收集后应立即-20℃保存,若长期保存应-70℃。
·样本量的要求:若一个指标做复孔检测应不少于250ul,做单孔检测应不少于120ul。建议若客
户样本量充足提供500ul以上。
·客户的样本收集后,立即按要求保存,切忌反复冻融。外地客户邮寄需要用干冰运输。邮寄前请与沟通确认。